Микроскопия
Лабораторные анализы хоть один раз в жизни сдавал каждый человек, хотя, без сомнения, данные исследования проводятся гораздо чаще. Они входят в группу обязательных профилактических исследований и помогают выявить патологию, когда отсутствуют какие-либо симптомы.
Сложно переоценить важность лабораторной диагностики, ведь она предоставляет врачу до 80% важной диагностической информации. Она помогает подтвердить или опровергнуть диагноз, проследить динамику и эффективность лечения, выявить возбудителя заболевания и определить патологические процессы, происходящие в организме человека.
Лабораторная диагностика биологических материалов в медицине проводится с помощью специализированного оборудования, одним из которых является оптический прибор микроскоп. Различные исследования в медицине под многократным увеличением, которые проводятся с помощью микроскопа, называются микроскопия.
История появления микроскопа
Когда появился первый микроскоп доподлинно неизвестно, но попытки рассмотреть мелкие предметы с помощью увеличительного стекла (двояковыпуклой оптической линзы) предпринимались еще в Древнем Риме.
Первый прибор отдаленно похожий на микроскоп создали голландский оптик Ганс Янсен со своим сыном. Они первыми обнаружили, что при использовании двух линз можно получить многократно увеличенное изображение. Их аппарат напоминал скорее подзорную трубу, но в отличие от последней, не приближал предметы, а увеличивал их.
Увеличительный прибор с вогнутой и выпуклой линзами разработал Галилео Галилей и назвал его «окколино» или «маленький глаз». Термин «микроскоп» предложил друг Галилея Джовани Фабер. Созданные приборы были весьма примитивными и позволяли получить изображение, увеличенное в 9-10 раз.
Первый микроскоп, похожий на современные аналоги, представлял собой металлическую пластину в центре которой располагалась линза. Его создал нидерландский натуралист Антони ван Ливенгук, с его помощью ему удалось сделать важные открытия в строении и функционировании человеческого организма. Он рассмотрел состав крови, структуру тканей, а также увидел бактерии. С помощь микроскопа Левенгука можно было получить увеличение до 270 раз.
К разработке микроскопа внесли свой вклад и русские ученые – Петр Кулибин и Михайло Ломоносов. Последний использовал микроскоп для своих исследований.
Виды микроскопических исследований
С помощью микроскопа можно исследовать различные клетки человеческого организма. Для исследования берутся различные биологические материалы – кровь, моча, сперма, мазки, отделяемое слизистых и т.д.
В медицине сегодня проводятся несколько видов микроскопических исследований – стереоскопическая, инфракрасная, люминесцентная, ультрафиолетовая, рентгеновская, поляризационная микроскопии.
Анализ крови позволяет определить количественный и качественный состав крови, соотношение ее форменных элементов, выявить атипичные или незрелые клетки. Микроскопический анализ мочи позволяет определить наличие солей, клеточных элементов и цилиндров, исследование позволяет выявить имеющиеся проблемы в водно-электролитном балансе организма, также в нарушения процессов обмена веществ.
Несмотря на то, что сегодня широко используются специальные электронные аппараты для проведения лабораторных исследований – анализаторы, визуальный осмотр биологических материалов для выявления атипичных или незрелых клеток по-прежнему выполняется медицинским персоналом с помощью микроскопов.
В медицинских центрах «Гайде» можно пройти все виды лабораторных исследований. В любое удобное время и по доступной цене можно выполнить любые виды лабораторной диагностики, и по ее результатам получить квалифицированную консультацию специалиста по профилю заболевания. Записаться на консультацию можно по телефонам, указанным на сайте.
Открытие новой семейной клиник Гайде!
УЗИ в Центральном районе
Предлагаем программы добровольного медицинского страхования
ООО «Медицинский центр ГАЙДЕ», Огрн 1137847479813, Лицензия № 78-01-005274 от 14.11.2014, № ЛО-78-01-008761 от 17.04.2018.
Call-центр:
+7 (812) 322-93-07,
8(921)566-78-83
СПб, Херсонская, д. 2 +7 (812) 322-93-91
СПб, Херсонская, д. 4 +7 (812) 322-93-90
СПб, Лиговский пр., 108А +7 (812) 611-08-26
Корпоративным клиентам: +7 (812) 900-36-36
Медицинский центр «Гайде», 2020. Информация на сайте не является публичной офертой и носит справочный характер.
ЗАПИСАТЬСЯ НА ПРИЕМ
ЗАПИСАТЬСЯ К СПЕЦИАЛИСТУ
Микроскопия
Запись онлайн
Записаться к гинекологу
Программа “Амбулаторно-поликлиническое обслуживание» АП
Премия на одного человека — 14 400 р.
Страховая сумма на одного человека 80 000
Страховым случаем является обращение Застрахованного лица за медицинскими услугами в связи с возникновением у Застрахованного острого заболевания, обострении хронического заболевания, отравлении и травме.
Первичное обращение за медицинскими услугами осуществляется через диспетчерскую службу страховой компании: — по телефонам: 611-00-17, 611-00-18, круглосуточно, далее – запись осуществляется через регистратуру базовой клиники по телефонам.
8 (812) 322-93-91 ул. Херсонская 2
8 (812) 322-93-90 ул. Херсонская 4
8 (812) 611-08-26 Лиговский пр., 108А
Программа включает:Амбулаторно-поликлиническое обслуживание в ООО «МЦ ГАЙДЕ»
По адресу: СПб, ул. Херсонская д.2/9, ул. Херсонская 4 и Лиговский пр. д. 108
Лечебно-диагностические приемы врачей:
Диагностические исследования:
лабораторная диагностика: биохимические исследования, гормональные исследования (гормоны щ/ж), микробиологические исследования, общеклинические исследования (клинический анализ крови, общий анализ мочи, копрограмма), гистологические, серологические, общий иммуноглобулин Е; обследование на флору, биоценоз, цитологию, исследования на онкомаркеры), обследование на заболевания, передающиеся половым путем, только методом ПЦР (однократно не более 3 исследований суммарно) без контроля лечения;
Процедуры и лечебные манипуляции:
Помощь на дому
Помощь на дому оказывается в территориальных пределах 20 км от КАД в соответствии с режимом работы базового лечебного учреждении
Исключения из Программ добровольного медицинского страхования.
Страховым случаем не является:
СК не оплачивает
слуховые аппараты и другие медицинские изделия; изделия, предназначенные для ухода за больными, включая средства личной гигиены; лекарственные средства при амбулаторно-поликлиническом лечении, наложение иммобилизации при травмах из синтетических полимерных материалов.
Перечень ЛПУ по Программе (АП) Лечебные учреждения:
ООО «Медицинский центр ГАЙДЕ» —
СПб, ул. Херсонская, д.2/9;СПб, ул. Херсонская, д.4
12 методов в картинках: микроскопия
Авторы
Редакторы
Один из старейших научных приборов — микроскоп — появился практически одновременно с наукой в ее современном виде. Этот канонический инструмент биолога более 400 лет был важнейшим средством для познания живого, и дал львиную долю наших знаний об устройстве жизни. Все это время эволюция микроскопа продолжалась, расширяя возможности увидеть неразличимое глазом.
12 биологических методов в картинках
Генеральный партнер цикла — компания «Диаэм»: крупнейший поставщик оборудования, реагентов и расходных материалов для биологических исследований и производств.
Одна из главных миссий «Биомолекулы» — докопаться до самых корней. Мы не просто рассказываем, какие новые факты обнаружили исследователи — мы говорим о том, как они их обнаружили, стараемся объяснить принципы биологических методик. Как вытащить ген из одного организма и вставить в другой? Как проследить в огромной клетке за судьбой нескольких крошечных молекул? Как возбудить одну крохотную группу нейронов в огромном мозге?
И вот мы решили рассказать о лабораторных методах более системно, собрать воедино в одной рубрике самые главные, самые современные биологические методики. Чтоб было интереснее и нагляднее, мы густо проиллюстрировали статьи и даже кое-где добавили анимации. Мы хотим, чтобы статьи новой рубрики были интересны и понятны даже случайному прохожему. И с другой стороны — чтобы они были так подробны, что даже профессионал мог бы обнаружить в них что-то новое. Мы собрали методики в 12 больших групп и собираемся сделать на их основе биометодический календарь. Ждите обновлений!
История микроскопии
На пороге микромира
Собирающие (увеличивающие) линзы были известны с XI века, и очки распространились по Европе уже в XIV веке. Традиционно изобретение первого составного микроскопа приписывают отцу и сыну — Хансу и Захарию Янсенам в 1595 году (рис. 1). Этот первый микроскоп мог увеличивать изображение всего в 3–9 раз. Есть версия, что первый микроскоп создал Корнелиус Дреббель. Среди изобретателей первых микроскопов был и Галилей, создавший свой микроскоп в 1609 году. Так или иначе, ни один из изобретателей не оставил подробных описаний микромира. Микроскопия как наука началась с Роберта Гука, который в 1665 году издал Micrographia — книгу, в которой подробно описывались устройство микроскопа, основы оптики и первые наблюдения за биологическими объектами, иллюстрированные подробными рисунками [1]. Микроскоп Гука (рис. 2) состоял из трех линз и источника света — эта основа сохраняется и в современной микроскопии. Однако достичь больших увеличений удалось с помощью более простой конструкции — Антони ван Левенгук использовал, казалось бы, примитивный микроскоп всего с одной линзой (рис. 2). Однако благодаря высочайшему качеству этой линзы ему удалось достичь 200-кратного увеличения и описать клетки простейших и даже крупные бактерии. Использование всего одной линзы не создавало оптических аберраций, которые только множились при конструировании более сложной оптической системы.
Генеральный партнер цикла «12 методов» — компания «Диаэм»
«Диаэм» — крупнейшая российская компания, специализирующаяся на поставке оборудования и реагентов ведущих мировых производителей в области микроскопии: от микроскопов начального уровня до исследовательских, конфокальных и мультифотонных систем, а также автоматизированных биоимиджинговых систем, способных поддерживать жизнеспособность клеток при постановке длительных экспериментов.
Материал предоставлен партнёром — компанией «Диаэм»
Рисунок 1. Микроскопия: этапы большого пути. 1590 г. — Захарий и Ханс Янсены создают первый микроскоп. 1665 г. — первое издание книги Роберта Гука Micrographia: описание и иллюстрации первых микроскопических исследований. 1674 г. — Антони ван Левенгук с помощью своего микроскопа описывает инфузории, а в дальнейшем — бактерии, сперматозоиды, вакуоли внутри клетки и т.п. 1858 г. — Йозеф фон Герлах разрабатывает окрашивание кармином — одной из первых гистологических красок. 1878 г. — Эрнст Аббе выводит формулу Аббе, позволяющую вычислить максимальное разрешение, исходя из длины волны. 1911 г. — Оскар Хеймштадт изобретает первый флуоресцентный микроскоп. 1929 г. — Филипп Эллингер и Август Хирт конструируют эпифлуоресцентный микроскоп, в котором эффективно отфильтровывалось излучение от источника света. 1932 г. — Фриц Цернике изобретает фазовый контраст, позволяя рассматривать живые неокрашенные объекты с большим контрастом. 1933 г. — Эрнст Руска совместно с Максом Кноллем создает первый электронный микроскоп. В 1939 году с его помощью выпустили первый коммерческий электронный микроскоп. 1934 г. — Джон Маррак получает первый конъюгат антитела с красителем. Первое практическое использование Альбертом Кунсом, усовершенствовавшим технику конъюгацией с флуоресцентной меткой. 1942 г. — Эрнст Руска создает сканирующий электронный микроскоп. 1962 г. — первое описание GFP Осамой Симомурой. 1967 г. — первое использование конфокальной микроскопии Моймиром Петраном, Дэвидом Эггером и Робертом Галамбосом. 1969 и 1971 гг. — первое описание конфокальной лазерной микроскопии. 1981 г. — Герд Бинниг и Генрих Рорер создают первый сканирующий туннельный микроскоп. 1986 г. — Герд Бинниг, Келвин Куэйт и Кристофер Гербер изобретают атомно-силовую микроскопию. 1990 г. — Винфрид Денки и Джеймс Стиклер разрабатывают первый двухфотонный микроскоп. 1994 г. — Штефан Хелл: суперразрешающая электронная микроскопия на основе подавления спонтанного испускания (STED). 2006 г. — изобретение PALM/STROM-микроскопии. Чтобы увидеть рисунок в полном размере, нажмите на него.
Рисунок 2а. Первые «ласточки». Микроскоп Гука (реконструкция).
КОНТАКТНАЯ БИОМИКРОСКОПИЯ И МИКРОФЛЮОРИМЕТРИЯ КОЖИ В ДИАГНОСТИКЕ ДЕРМАТОЗОВ
В Методических рекомендациях впервые представлены сведения по методике ранней прижизненной диагностики, изучению микроструктуры и функции кожи при помощи контактной биомикроскопии и микрофлюориметрии эпидермиса и дермы через «кожное окно».
Кратко изложено описание типов контактных микроскопов и принципов работы с ними, применительно к дерматологической практике.
Применение контактной биомикроскопии позволяет производить раннюю диагностику дерматозов при массовых медицинских осмотрах. Сочетанное применение контактной микрофлюориметрии с прижизненной микроскопией кожи позволяет прогнозировать течение аллергических дерматозов по степени нарушения функций кератиноцитов, макрофагов, клеток Лангерганса, биомембран кожи.
Рассчитаны они на врачей дерматовенерологов, клинико-диагностических лабораторий кожно-венерологических диспансеров, дерматологов-профпатологов медико-санитарных частей промышленных предприятий.
1. Прижизненные методы микроскопии
Применение контактных микроскопов создает новые перспективы исследования в биологии, медицине, т.к. дает возможность изучать не только тонкую клеточную структуру и ее изменение в живых клетках и тканях, но и позволяет вести наблюдения за физиологическими функциями живых органов, протекающими в них физиологическими, патологическими и транспортными процессами. Контактная биомикроскопия широко используется для изучения прижизненной структуры ткани, особенностей клеточного инфильтрата, нарушений микроциркуляции и транспортных процессов на мембранах при развитии патологических процессов во внутренних органах.
Интерес к контактной биомикроскопии в дерматологии обусловлен стремлением расширить возможности ранней диагностики и осуществления контроля за лечением при ряде дерматозов. Прижизненная микроскопия кожи с помощью операционного микроскопа позволяет выявить детали морфологических элементов, однако предельное 32-кратное увеличение ограничивает его возможности, в то время как контактная биомикроскопия применяется при изучении патогенеза и диагностики некоторых дерматозов и характера воздействия химических веществ на кожу в эксперименте на морских свинках.
2. Контактные микроскопы
Нашей промышленностью выпускаются следующие приборы для контактной микроскопии: ОЛК-1, ОЛК-2, микроскопы МЛ-1, МЛК-1, ЛЮМАМ-КТ, ЛЮМАМ-1, ЛЮМАМ-К-1Ф и другие. Эти приборы, выпускаемые ЛОМО, дают возможность проводить исследования кожи в достаточно широком диапазоне режимов.
Данная установка разбирается, ее легко транспортировать и, следовательно, можно использовать при проведении массовых медицинских осмотров. При проведении контактной биомикроскопии кожи в любом режиме наиболее оптимальным прибором является микроскоп ЛЮМАМ И-3 (рис. 3, 4), который имеет в комплексе контактные объективы ЛК 10 х 0,40, ЛК 25 х 0,75, ЛК 43 х 1,0, ЛК 60 х 1,15, а также контактные эпиобъективы 10 х 0,20, 10 х 0,30, 20 х 0,40, 20 х 0,60, 20 х 0,80. Применение имеющихся в его комплексе устройств ОЛК-2, ФМН-11 позволяет проводить контактную биомикроскопию и микрофотографирование кожи. Использование микрофлюориметра ФМЭЛ-1А с зондами 0,1 и 0,5 позволяет проводить прижизненные исследования функционального состояния клеток кожи, транспортных процессов, микроциркуляции тканевой жидкости и крови.
3. Методы контактной биомикроскопии (КБ) кожи
3.1. Флюоресцентная микроскопия. При биомикроскопии кожи
необходимо применять освещение в падающем свете. Собственная
флюоресценция кожи выражена слабо, поэтому необходимо
подкрашивание исследуемого участка флюорохромами: флюоресцеином,
уранином, акридиновым оранжевым, примулином, риванолом,
хлортетрациклином, родамином. Как правило используются растворы в
концентрациях 1 х 10 М, 1 х 10 М, не оказывающих токсического
действия на живые ткани и клетки. При исследовании морфологии кожи
оптимальным флюорохромом является акридиновый оранжевый (АО)
дифференцированно окрашивающий ядра и цитоплазму кератиноцитов, а
также тучные и плазматические клетки, лимфоциты, фибробласты и
При флюоресцентной микроскопии после окраски АО используются
фильтры возбуждающие УФС-6, ФС-1, запирающие светофильтры ЖС-18 и
ЖС-19, теплозащитный фильтр СЗС. При проведении микрофлюориметрии
клеток кожи с помощью насадки ФМЭЛ-1А можно использовать
3.2. Флюоресцентно-абсорбционный метод. При этом методе
применяется комбинированная окраска кожи флюорохромом и обычным
красителем, например, флюоресцеином (5 х 10 М) и 1% раствором
метиленового синего или нейтрального красного.
3.4. Темнопольная микроскопия. При этом режиме микроскопии кожу окрашивают 1% водным раствором метиленового синего, 0,5% раствором толуидинового синего. Микроскопия проводится с контактными эпиобъективами 10 х 0,20, 20 х 0,60, 20 х 0,80. Они предназначены для работы в области спектров с длиной волны от 272 нм до 650 нм.
4. Подготовка кожи для контактной биомикроскопии (КБ)
При КБ поверхности кожи окраску производят не во всех случаях. При определении структуры поверхности рогового слоя, включений и инородных тел на поверхности кожи (пыль, элементы стекловолокна, частицы металла, красителей), возможна КБ без предварительной обработки кожи красителем. Собственная флюоресценция поверхности рогового слоя позволяет определить особенность его поверхности, треугольные и ромбовидные поля, включения. При необходимости определения отдельных чешуек рогового слоя, выявления феномена паракератоза, микроабсцессов, поверхность рогового слоя обрабатывается АО в концентрации 1:5000.
При КБ более глубоких слоев скарифицируют кожу, при которой снимается роговой (и блестящий) слой. Полученная экскориация обрабатывается красителем, в нее вводится фронтальная линза контактного объектива и проводится КБ по одному из описанных режимов.
5. Контактная биомикроскопия в диагностике дерматозов
у рабочих промышленных предприятий
5.1. Пути применения КБ при профессиональной патологии. Данный метод позволяет не только изучить детали морфологических элементов, но и выяснить особенности их гистологической структуры, проследить в динамике эволюцию патологического процесса в коже. КБ у рабочих промышленных предприятий показана в качестве диагностического метода, в том числе при проведении массовых медицинских осмотров, а также при проведении контроля излеченности дерматозов. Кроме того, данный метод позволяет выявить загрязнение кожи производственными факторами. Сочетание КБ с микроспектрофлюориметрией (прибор ФМЭЛ-1А) дает возможность оценивать функциональное состояние мембран кожи и транспортных процессов на них.
Возможно применение КБ при определении соединений металлов на коже с помощью раствора 8-оксихинолина. Обработка кожи насыщенным водным раствором 8-оксихинолина вызывает реакцию его с металлами. При этом образуются комплексные соединения, флюоресцирующие при освещении их лучами ультрафиолетовой части спектра (фильтр УФС-6). Таким методом на коже определяются соединения алюминия, бериллия, галлия, индия, кадмия, лития, магния, олова, скандия, цинка, циркония. Открываемый минимум в мкг/мл металла и предельные его концентрации, определяемые флюоресцентным методом, представлены в табл. 1.
ОТКРЫВАЕМЫЙ МИНИМУМ И ПРЕДЕЛЬНЫЕ КОНЦЕНТРАЦИИ МЕТАЛЛОВ,
ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ИХ ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ
С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ 8-ОКСИХИНОЛИНА
¦ Металл ¦ Открываемый минимум в мкг/мл ¦ Предельная концентрация ¦
¦ Магний ¦ 0,025 ¦ 1:2 х 10 ¦
¦ Бериллий ¦ 0,012 ¦ 1:8 х 10 ¦
¦ Кадмий ¦ 0,1 ¦ 1:5 х 10 ¦
¦ Скандий ¦ 1,2 ¦ 1:8 х 10 ¦
¦ Алюминий ¦ 0,004 ¦ 1:2 х 10 ¦
¦ Галлий ¦ 1,0 ¦ 1:1 х 10 ¦
¦ Индий ¦ 0,05 ¦ 1:5 х 10 ¦
¦ Цирконий ¦ 2,5 ¦ 1:2 х 10 ¦
¦ Олово ¦ 3,0 ¦ 1:1 х 10 ¦
¦ Литий ¦ 1,0 ¦ 1:5 х 10 ¦
Эти данные свидетельствуют о высокой чувствительности флюоресцентного метода определения металлов на коже с помощью 8-оксихинолина. Использование микрофлюориметра ФМЭЛ-1А в комбинации с аппаратом Щ-4300 позволяет определить концентрацию металла на поверхности и динамику ее изменения в глубоких слоях кожи, путем количественного определения степени флюоресценции.
5.3. КБ при диагностике дерматитов. КБ кожи рабочих промышленных предприятий может быть применена при диагностике дерматитов. При контактных дерматитах, вызванных облигатными раздражителями (кислоты, щелочи), отмечается большое количество клеточного детрита. Роговой слой теряет структуру, не определяются отдельные роговые чешуйки, а также треугольные и ромбовидные поля. Среди клеточного детрита просматриваются участки с разрушенными кератиноцитами. Наблюдается инфильтрация эпидермиса и дермы преимущественно сегментоядерными лейкоцитами. При контактном аллергическом дерматите обнаруживается усиление десквамации в роговом слое при сохранении, как правило, его структуры и преимущественно лимфоцитарная инфильтрация эпидермиса и дермы. Изменения кератиноцитов на эрозивных участках не достигают большой степени и представляют неравномерным свечением ядер, увеличением числа клеток с желто-оранжевым свечением цитоплазмы.
При проведении кожных проб существует возможность получения ложноположительных результатов при использовании химических веществ в концентрациях, оказывающих первично-раздражающее действие.
Применение КБ после экскориации кожи на месте положительной пробы подтверждает наличие гиперчувствительности при обнаружении типичной лимфоидной инфильтрации дермы. Лучшим методом окраски при этом является обработка экскориации АО в концентрации 1:10000 на изотоническом растворе хлористого натрия.
5.4. КБ при выявлении ранних признаков профессиональных дерматозов. При КБ кожи кистей рабочих с эпидермитами, имеющих контакт с соединениями хрома, никеля, бериллия, выявляются больные, у которых поражение рогового слоя, характерное для эпидермита, сочетается с гистологическими изменениями, свидетельствующими о наличии контактной гиперчувствительности (лимфоидная инфильтрация эпидермиса и дермы, уменьшением количества клеток Лангерганса в эпидермисе и повышение их металлофильности, повышение металлофильности макрофагов дермы, увеличение количества лизосом в кератиноцитах, нарушения гемомикроциркуляции и микроциркуляции тканевой жидкости). При истинных эпидермитах КБ показывает лишь нарушение вторичной структуры рогового слоя эпидермиса при отсутствии патологических изменений в других слоях эпидермиса и дермы.
5.5. КБ при диагностике псориаза. При КБ после окрашивания АО кожи хорошо выявляется феномен паракератоза, при этом на поверхности элементов обнаруживаются клетки рогового слоя с тускло-зеленой цитоплазмой и интенсивно-светящимся изумрудным ядром. По выраженности паракератоза (единичные корнеоциты с ядрами, ограниченные или обширные участки) можно судить о степени нарушения созревания клеток эпидермиса, что в определенной степени характеризовало активность псориатического процесса. Среди клеток рогового слоя встречаются сегментоядерные лейкоциты с зеленым свечением ядра и красным свечением цитоплазмы, нередко образовавшие скопления (псевдоабсцессы Мунро).
При лечении больных псориазом метотрексатом проведение КБ в динамике позволяет определить оптимальное время отмены препарата.
Исчезновение ядер в корнеоцитах служит показанием для отмены цитостатиков. После I курса лечения метотрексатом ядра клеток рогового слоя приобретают дегенеративные формы (уменьшение объема, фрагментация, ядра палочковидные или в виде зернистости), что, как правило, совпадает с началом клинического регресса.
5.6. КБ при диагностике пузырных дерматозов. При обследовании рабочих промышленных предприятий нередко возникает необходимость проведения дифференциального диагноза при наличии пузырных элементов на коже. КБ помогает выяснить характер расположения пузырей в коже (субкорнеальный, интраэпидермальный, субэпидермальный). В некоторых случаях при отсутствии выраженного вторичного инфицирования, КБ позволяет выявить на поверхности эрозий акантолитические клетки или эозинофилы, лимфоциты, сегментоядерные лейкоциты, плазматические клетки. Акантолитические клетки имеют крупное ядро и интенсивно светящуюся красную цитоплазму. При касании фронтальной линзы объектива дна эрозий отмечается легкая дезинтеграция клеток эпидермиса. При КБ герпетических эрозий хорошо различаются многоядерные крупные клетки с интенсивно окрашенной АО красной цитоплазмой.
5.7. КБ при диагностике чесотки. Необходимость нахождения чесоточного клеща важна при атипичной и осложненной чесотке, особенно при поражении кожи у детей, когда возникают диагностические трудности. Опыт показал, что КБ является более рациональным и простым методом обнаружения чесоточного клеща, чем извлечение его иглой из чесоточного хода или срезание бритвой рогового слоя с последующей микроскопией. При КБ кожи на участке высыпаний при чесотке хорошо определяются на поверхности рогового слоя извитые «траншееподобные» поверхностные ходы, в которых находятся клещи с хорошо различимой структурой, чаще их отдельные фрагменты, членики. В поверхностных «траншееподобных» ходах зачастую видны фекалии, яйца клещей, клеточный дейтрит.
При прижизненной микроскопии у больных разноцветным лишаем отмечается разрыхление рогового слоя, исчезновение упорядоченной структуры в виде ромбовидных и треугольных полей. При окраске АО, АЖ определяются нити мицелия и споры с желто-оранжевой флюоресценцией. При микозах стоп в роговом слое определяются (часто на фоне очагов паракератоза) споры и нити гриба, имевшие желто-оранжевую флюоресценцию. При дисгидротической форме микоза на эрозированных участках мицелий часто имеют желто-оранжевый спектр свечения. При КБ эрозивных участков в эпидермисе и дерме выявляются: клеточный детрит, лимфоидные клетки, ПМЯ-лейкоциты, единичные плазматические клетки, макрофаги. При онихомикозах КБ позволяет уточнить состояние ногтевой пластинки, окружающих ее мягких тканей, капилляров, ногтевого ложа. Мицелий гриба определяют в глубоких слоях ногтевой пластинки. Гифы гриба с желто-оранжевой флюоресценцией различной толщины располагаются в ногтевой пластинке в разных направлениях. При КБ очагов микроспории в эпидермисе отмечаются элементы гриба в виде фрагментов тонкого светящегося мицелия. Вокруг основания волос определяются мелкие споры с изумрудным свечением.
5.10. Применение КБ при диагностике поражений слизистой полости рта и красной каймы губ. Поражения слизистой полости рта (особенно изолированные) нередко представляют диагностические трудности, особенно при отсутствии типичных высыпаний на коже. Исследование биоптатов не всегда разрешает диагностические трудности из-за большого количества артефактов, обусловленных малым размером фрагментов тканевого материала.
Применение контактной биомикроскопии позволяет выявить участки патологически измененной слизистой, уточнить характер морфологических элементов, обнаружить рубцы, очаги лейкокератоза, уточнить характер эрозий, особенности клеточного инфильтрата.
6. Прижизненная микрофлюориметрия в диагностике дерматозов
6.1. Диагностические возможности прижизненного люминесцентного анализа. В последние годы люминесцентный анализ стал широко использоваться в диагностике заболеваний. Это обусловлено его высокой информативностью, возможностью проводить прижизненное исследование морфофункциональных изменений органов и систем в норме и патологии.
Усиление клеточного дыхания сопровождается изменением соотношения компонентов дыхательной цепи в сторону преобладания окисленных форм. Поэтому, при усилении дыхания клетки в ней нарастает желто-зеленая и затухает синяя флюоресценция. При этом флюоресцентный анализ окислительно-восстановительных процессов в живых клетках выявляет ранние признаки развития патологических изменений.
6.2. Люминесцентный анализ в дерматологии. Люминесцентный анализ основывается на свойстве кожи менять характер люминесценции при патологических процессах (псориаз, красная волчанка, сифилис). Вместе с тем, метод макроскопического исследования люминесценции с визуальной оценкой изменений малоинформативен, носит ориентировочный характер.
